دانلود پایان نامه بررسی تثبیت بیولوژیک نیتروژن در اثر همیاری سویه های مختلف باکتری آزوسپریلوم با ارقام مختلف گندم

اختصاصی از فی فوو دانلود پایان نامه بررسی تثبیت بیولوژیک نیتروژن در اثر همیاری سویه های مختلف باکتری آزوسپریلوم با ارقام مختلف گندم دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

گرچه استفاده از کودهای بیولوژیک در کشاورزی از قدمت بسیار زیادی برخوردار است و در گذشته نه چندان دور تمام مواد غذایی مورد مصرف انسان با استفاده از چنین منابع ارزشمندی تولید می شده است ولی بهره برداری علمی از اینگونه منابع سابقه چندانی ندارد.اگرچه کاربرد کودهای بیولوژیک به علل مختلف در طی چند دهه گذشته کاهش یافته است ولی امروزه با توجه به مشکلاتی که مصرف بی رویه کودهای شیمیایی پدید آورده است،استفاده از آنها در کشاورزی مجددا مطرح شده است.بدون تردید کاربرد کودهای بیولوژیک علاوه بر اثرات مثبتی که بر کلیه خصوصیات خاک دارد،از جنبه اقتصادی،زیست محیطی و اجتماعی نیز مثمرثمر واقع شده و می تواند به عنوان جایگزینی مناسب و مطلوب برای کودهای شیمیایی باشد.در حال حاضر نگرشهای جدیدی که در ارتباط با کشاورزی تحت عنوان کشاورزی پایدار،ارگانیک و بیولوژیک مطرح می باشد به بهره برداری از چنین منابعی استوار است.(25)

مصرف کود شیمیایی ازته برای افزایش تولید محصول تا آینده ای قابل پیش بینی ادامه خواهد داشت،ولی باید در جهت استفاده بیشتر از تثبیت بیولوژیک نیتروژن توسط میکروارگانیزمها نیز توجه بیشتری معطوف شود.

باکتری جنس Azospirillum که یکی از مهمترین باکتریهای تثبیت کننده نیتروژن می باشد،با گیاهان تک لپه مختلفی از جمله گندم،برنج،ذرت،ارزن،چاودار و گراسهای علفی مانند پنجه مرغی،کالارگراس قادر به ایجاد همیاری است.(5و2و3ارزانش)نتیجه این همیاری علاوه بر تثبیت نیتروژن مولکولی،تولید موادی چون سیدروفور،باکتری کشها و فیتوهورمونها می باشد که ماحصل ترشح تمام موارد ذکر شده افزایش توان جذب عناصر غذایی،توسعه سیستم ریشه ای و در نهایت افزایش عملکرد می باشد.(10و4و6) تلقیح گیاهان با آزوسپریلوم علاوه بر 35-5 درصد افزایش عملکرد باعث کاهش مصرف کود ازته نیز می شود.(7)تلقیح گیاه با این باکتری باعث افزایش طول ریشه های فرعی و تارهای کشنده،ارتفاع گیاه و همچنین جذب عناصر غذایی می شود.(8)

از طرفی نیز گندم به عنوان مهمترین گیاه زراعی در کشور ما و در دنیا محسوب می شود.از مجموع 27/10میلیون هکتار اراضی سالانه در سال 1379، حدود 01/7 میلیون هکتار معادل 27/68 درصد به سطح غلات اختصاص داشته است.محصول گندم با 75/72 درصد رتبه اول را دارا می باشد.

لذا در این تحقیق تثبیت بیولوژیک نیتروژن در اثر همیاری سویه های  مختلف باکتری آزوسپریلوم با ارقام بومی،اصلاح شده و لاین موتانت با استفاده از تکنیک ایزوتوپ پایدار 15N بررسی شد.

چکیده10    
مقدمه 13                                                                            
فصل اول:کلیات      15                                                                     
1-کشاورزی پایدار                            16    
1-1کودهای بیولوژیک18
1-2استفاده از میکرو‌ارگانیزم‌ها به عنوان کود بیولوژیک19
1-3-انواع کودهای بیولوژیک20
2-اهمیت گندم20
2-1-تاریخچه و پیدایش گندم22
2-2-وضعیت کشت گندم در جهان22
2-3-وضعیت کشت گندم در ایران24
2-4-وضعیت کشت گندم در استان تهران25
2-5-شرایط آب‌وهوایی گندم26
2-6-مرفولوژی گندم27
2-6-1-ریشه27
2-6-2-ساقه28
2-6-3-پنجه29
2-6-4-برگ30
2-6-5-گل‌آذین31
2-6-6-دانه32
2-7-عوامل محیطی مؤثر بر رشدونمو گندم33
2-7-1خاک33
2-7-2-رطوبت34
2-7-3-حرارت35
2-7-4-نور36
2-7-4-1-طول روز36
2-7-4-2-شدت نور36
2-8-عملکرد دانه گندم و عوامل مؤثر بر آن36
فصل دوم:بررسی منابع42
1-نیتروژن در طبیعت43
2-شکلهای نیتروژن در خاک44
2-1-نیتروژن معدنی خاک45
2-2-  نیتروژن آلی خاک45
3-نقش نیتروژن در گیاه45
4-چرخه نیتروژن46
4-1راههایی که نیتروژن در دسترس گیاه قرار می‌گیرد
 و یا به خاک اضافه می‌شود 47
4-1-1معدنی شدن نیتروژن خاک47
4-1-2وارد شدن نیتروژن از اتمسفر به خاک48
4-1-3-کاربرد کودهای شیمیایی ازته49
4-1-4-تثبیت نیتروژن به روش بیولوژیک50
4-2-راههایی که نیتروژن از دسترس گیاه و یا از خاک خارج می‌شود51
4-2-1-غیر متحرک شدن (متوقف شدن یا آلی شدن ) نیتروژن51
4-2-2-نیترات زدایی52
4-2-3-جذب نیتروژن بوسیله گیاهان54
4-2-4-آبشویی نیتروژن55
4-2-5-تلفات نیتروژن به صورت آمونیاک55
4-2-6-تلفات نیتروژن از طریق فرسایش56
5-سیستمهای بیولوژیک تثبیت کننده نیتروژن56
5-1تثبیت نیتروژن به روش همزیستی57
5-1-1همزیستی باکتریهای ریزوبیوم و گیاهان خانواده لگومینوز57
5-1-2-همزیستی ریزوبیوم با گیاهان غیر لگوم59
5-1-3-همزیستی اکتینوریزی59
5-1-4-همزیستی سیانوباکتریها و گیاهان60
5-1-4-1-همزیستی سیانوباکتری آنابنا و آزولا61
5-1-4-2-همزیستی نوسترک و آنابنا باسیکادها62
5-1-4-3-همزیستی سیانوباکتری نوسترک و گانرا62
5-1-5-همزیستی سیانوباکتریها و دیاتومه‌ها63
5-1-6-همزیستی سیانوباکتریها و بریوفیتها63
5-1-7-همزیستی سیانوباکترها و قارچها (تشکیل گلسنگ)65
5-2-تثبیت نیتروژن به روش آزاد65
5-2-1-باکتریهای هتروتروف باکتریهای بیهوازی66
5-2-1-1-باکتریهای بی هوازی66
5-2-1-2-باکتریهای بیهوازی اختیاری67
5-2-1-3-باکتریهای هوازی67
5-2-1-4-سیانوباکتریها68
5-2-2-فتواتوتروف‌های آزادزی69
5-2-2-1-باکتریهای فتوسنتز کننده69
5-3-تثبیت نیتروژن به روش همیاری71
5-3-1-تعریف همیاری71
5-3-2-دلایل تثبیت نیتروژن به روش همیاری72
5-3-3-همیاریهای فیلوسفری72
5-3-4-همیاریهای ریزوسفری73
6-بیوشیمی تثبیت نیتروژن مولکولی73
6-1ساختار آنزیم نیتروژناز و نحوه تامین انرژی
 مورد نیاز برای تثبیت ازت مولکولی74
6-2کارایی77
6-3-تولید هیدروژن و خروج آن81
7-همیاری باکتریهای جنس آزوسپیریلوم  با گیاهان83
7-1اکولوژی آزوسپیریلوم83
7-2گیاهان میزبان84
7-3-طبقه‌بندی84
7-4-مشخصات باکتری85
7-5-تثبیت نیتروژن وابسته به هیدروژن88
7-6-احیای نیترات (نیترات زدایی)88
7-7-عوامل موثر در اشغال ریشه توسط آزوسپیریلوم و تاثیر آن بر رشد گیاه89
7-8-تولید ساختمان کیست مانند90
7-9-تولید سیدروفور91
7-10تولید مواد کشنده باکتریها92
7-11جذب سطحی باکتریها به ذرات خاک92
7-12-تولید فیتوهورمونها و دیگر مواد تحریک کننده رشد گیاه93
7-13-تغییر در فیزیولوژی و موروفولوژی ریشه93
7-14-نقشهای احتمالی موسیژل94
7-15-مکانیزمهای جذب آزوسپیریلوم بطرف ریشه94
7-16-شیمیوتاکتیک  (کموتاکتیک )95
7-17مراحل اشغال ریشه توسط آزوسپیریلوم97
7-17-1-اتصال باکتریها به پوست ریشه97
7-17-2-اشغال بافت ریشه98
7-18-تاثیر آزوسپیریلوم در عملکرد گیاهان مختلف98
8-نیتروژن -15105
فصل سوم:موادو روشها110
1-مواد مورد آزمایش111
1-1تهیه ماده تلقیح111
1-2-بررسی روابط همزیستی سویه‌های مخالف باکتری آزوسپریلوم با ارقام مختلف گندم با استفاده از ایزوتوپ15N در شرایط گلخانه112
1-2-1-زمان و محل اجرای آزمایش112
1-2-2-خصوصیات فیزیکی و شیمیایی خاک مورد استفاده112
1-2-3-دمای گلخانه113
1-2-4-مشخصات ارقام گندم مورد استفاده114
1-2-4-1-رقم طبسی114
1-2-4-2-رقم مهدوی114
1-2-4-3-رقم موتانت طبسی115
1-2-5-مشخصات طرح آزمایشی116
1-2-6-مشخصات فاکتورهای آزمایش116
1-2-7-عملیات کاشت و داشت116
1-2-8-کاربرد ایزوتوپ پایدار نیتروژن-15117
1-2-9-صفات اندازه‌گیری شده120
1-2-10-محاسبات آماری121
1-3-ارزیابی کارآیی سویه‌های باکتری آزوسپریلوم با  ارقام بومی، اصلاح شده و لاین موتانت گندم و تأثیر کاربرد آنها بر عملکرد و برخی از صفات زراعی گندم در شرایط آب‌وهوایی کرج121
1-3-1-خصوصیات اقلیمی منطقه121
1-3-2-مشخصات اقلیمی محل اجرای آزمایش در سال زراعی 83-1382122
1-3-3-خصوصیات فیزیکی و شیمیایی خاک محل آزمایش123
1-3-4-مشخصات ارقام مورد استفاده 123
1-3-5-مشخصات طرح آزمایشی123
1-3-6- مشخصات فاکتورهای آزمایش123
1-3-6-1-آزوسپریلوم123
1-3-7-عملیات زراعی124
1-3-7-1-عملیات کاشت124
1-3-7-2-علمیات داشت125
1-3-7-3-عملیات برداشت125
1-3-7-4-صفات اندازه‌گیری شده126
فصل چهارم:نتایج و بحث130
گلخانه131
1-ارتفاع گیاه132
2-طول سنبله135
3-تعداد پنجه گیاه138
4-سطح برگ پرچم141
5-وزن خشک اندام هوایی144
6-تعداد سنبله در گیاه147
7-درصد تثبیت بیولوژیک نیتروژن151
مزرعه154
8-ارتفاع گیاه155
9-طول سنبله158
10تعداد پنجه در گیاه161
11-سطح برگ پرچم163
12-تعداد سنبله درواحد سطح167
13-تعداد دانه در سنبله170
14-عملکرد دانه173
15-بیوماس177
16-شاخص برداشت181
17-وزن هزاردانه184
18-جذب نیتروژن186
پیوست190
منابع191

شامل 191 صفحه فایل word

ارزیابی میزان تولید داروی دسفرال از سویه استرپتومایسس پیلوسوس به روش بیولوژیک

اختصاصی از فی فوو ارزیابی میزان تولید داروی دسفرال از سویه استرپتومایسس پیلوسوس به روش بیولوژیک دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

جهت دانلود از لینک ا

بخشی از متن اصلی :

فهرست مطالب :

عنوان     صفحه

چکیده     1

مقدمه     3

فصل اول

1-1 - تالاسمی      8

1-2-اتیولوژی و سبب شناسی تالاسمی 8

1-2-1 - خون شناسی          9

1-2-2- خون سازی و گلبولهای قرمز  10

1-3- تالاسمی و انواع آن     10

1-3-1 آلفا تالاسمی 10

1-3-2- بتا تالاسمی            11

1-3-2-1 بتا تالاسمی مینور(سالم ناقل) 11

1-3-2-2 – بتا تالاسمی ماژور( بیماری تالاسمی)            12

1-3-2-3-بتا تالاسمی بینابینی            13

1-4- تشخیص تالاسمی        13

1-5- درمان تالاسمی           13

1-6- فیزیولوژی عنصر آهن و اهمیت آن در بدن انسان     14

1-6-1- مسمومیت حاد آهنی  15

1-7- دسفرال        16

1-7-1- نحوه استفاده از داروی دسفرال 17

1-7-2-کاربردهای داروی دسفرال در پزشکی     18

1-7-3- عوارض ناشی از داروی دسفرال          19

1-7-4- اقدامات احتیاطی در مورد داروی دسفرال            19

1-7-5- ملاک توقف درمان بوسیله دسفرال         20

فصل دوم

2-1- سیدرو فورها            22

2-1-1- هیدروکسامات ها     24

2-1-2-فنولات ها یا کاتکولات ها        25

2-2- دسفری اکسامین ها      26

2- 2-1 – ساختمان دسفری اکسامین     28

2-2-2- دسفراکسامین بصورت آنتی اکسیدان      28

2-2-3 – خصوصیات فیزیکو و شیمیایی دسفراکسامین      29

2-2-4- مکانیسم دسفراکسامین در جلوگیری از بیماریهای با بار اضافی آهن      29

2-2-5- تشکیل رادیکال DFO nitroxide         30

2-3- دسفری اکسامین B      31

2-3-1- بیوسنتر دسفری اکسامین B     33

2-3-2- ژنهای کد کننده دسفری اکسامین B        33

2-4- تولید کننده¬های دسفری اکسامین 34

2-5- اهمیت آهن بر روی میکروارگانیسمها        35

2-6- مکانیسم عمل سیدروفورها در ارتباط با انتقال آهن به درون سلول میکروارگانیسمها 36

2-7- تولید، استخراج و تخلیص دسفری اکسامین B           37

فصل سوم

3-1- اکتینومیست ها           40

3-2- استرپتومایسس ها        43

3-2-1- پاتولوژی  43

3-2-2 – مرفولوژی و ساختمان         43

3-2-3- مشخصات کلنی       454

3-2-4- اسپورزایی            47

3-2-5- ترکیبات پوشش سلولی          49

3-2-6- تغذیه و فاکتورهای موثر بر رشد و خصوصیات فیزیکوشیمیایی         49

3-2-6-1- تغذیه    49

3-2-6-2- اکسیژن 50

3-2-6-3 - رطوبت            50

3-2-6-4- دما       51

3-2-6-5- pH      51

3-2-6-6- اکولوژی           52

3-2-6-7- بیولوژی توسعه یافته استرپتومایسس  53

3-2-7- انواع فرآورده های میکروبی   56

3-2-7-1- متابولیت های اولیه           56

3-2-7-2- متابولیت های ثانویه          56

3-2-7-2-1- آنتی بیوتیک ها 58

3-2-7-2-1-1- فیزیولوژی و تنظیم تولید آنتی بیوتیک      58

3-2-7-3- آنزیمها  63

3-2-7-3-1- پروتئازها       63

3-2-7-3-1-1- پروتئازهای اسیدی     67

3-2-7-3-1-1-1- رنین       67

3-2-7-3-1-2- پروتئازهای خنثی      67

3-2-7-3-1-3- پروتئاز های قلیایی     67

3-2-7-3-1-3-1- فرآیند تخمیر پروتئازهای قلیایی           68

3-2-7-3-1-3-2- تعیین فعالیت پروتئاز قلیایی   69

3-2-7-3-1-4- بازدارنده های فعالیت آنزیم پروتئاز وشلاته کننده ها  69

3-2-7-3-1-5- تجزیه        71

3-2-7-3-1-6- پروتئاز ها و استرپتومایسسها     71

3-2-8- محیط کشت تخمیر صنعتی    71

3-2-8-1- نیازهای غذایی میکروارگانیسم‌ها       71

3-2-8-1-1- کربن 74

3-2-8-1-1-1- منابع کربن و استرپتومایسس ها  77

3-2-8-1-2-نیتروژن          78

3-2-8-1-2-1- منابع نیتروژن و استرپتومایسس ها         80

3-2-8-1-3- هیدروژن و اکسیژن       80

3-2-8-1-4- مواد معدنی     80

3-2-8-2-تنظیم کننده های متابولیکی   81

3-2-8-3- ضد کف ها         82

3-2-9- بیوسنتز در استرپتومایسس ها 83

فصل چهارم

4-1- دستگاه های مورد استفاده           86

4-2- وسایل مورد استفاده     86

4-3 - محیط های کشت مایع برای رشد باکتری   88

4-4- محیط های کشت جامد برای رشد باکتری    89

4-5- محیط های جامد برای تولید اسپور           89

4-6- مواد لازم جهت رنگ آمیزی گرم 90

4-7- مواد لازم جهت استفاده از میکروسکوپ نوری         91

4-8- محیط مورد استفاده جهت شناسایی کیفی دسفری اکسامین: محیط Des4    91

4-9- محیط مورد استفاده جهت اندازه گیری تولید دسفری اکسامین محیط Soy bean      91

4-10- مواد لازم جهت نگهداری و ذخیره باکتری ها         92

4-11- معرف های دسفری اکسامین     92

4-12- مواد لازم جهت رسم منحنی استاندارد دسفری اکسامین B       92

4-13- مواد لازم جهت استخراج دسفری اکسامین 92

4-14- مواد لازم جهت تهیه محلول Lysing Buffer        93

4-14-1 – مواد لازم جهت تهیه محلول Tris Hcl 93

4-15- محلول کازئین %5/0 دربافر فسفات       93

4-15-1- بافر فسفات (PBS) 93

4-16- محلول لوری (Lowry)          93

فصل پنجم

5 – ١- تهیه و آماده سازی سویه استرپتومایسس پیلوسوس  98

5 ـ ٢ ـ بررسی خصوصیات مرفولوژیکی سویه استرپتومایسس پیلوسوس        98

5-٢-١- خصوصیات ماکروسکوپی      99

5- ٢-١-١- کشت استرپتومایسس پیلوسوس بر روی محیط جامد       99

5-٢-١-٢- کشت استرپتومایسس پیلوسوس در محیط مایع   99

5-٢-٢ خصوصیات میکروسکوپی       99

5-٢-٢-١- تهیه لام از محیط کشت جامد            99

5-٢-٢-٢- تهیه لام از محیط کشت مایع            100

5ـ ٢ـ٢ـ ٣ـ رنگ آمیزی گرم  100

5 ـ ٣ـ تهیه مایع تلقیح          100

5 ـ ٣ـ ١ـ تهیه محیط ذخیره   101

5 ـ ٣ـ ٢ـ تهیه سوسپانسیون اسپور      101

5ـ ٤ـ رسم منحنی رشد استرپتومایسس پیلوسوس  101

5ـ ٥ـ بررسی تغییرات pH در محیط کشت Soybean      102

5ـ ٦ـ تولید دسفری اکسامین توسط استرپتومایسس پیلوسوس            102

5ـ ٦ـ ١ـ تشخیص کیفی دسفری اکسامین            102

5ـ ٦ـ ٢ـ سنجش میزان تولید دسفری اکسامین در هر روز   103

5-6-3- رسم منحنی استاندارد دسفرال  103

5-٧ـ استخراج دسفری اکسامین بوسیله فنل-کلروفرم          104

5 ـ ٧ـ ١ـ مزتیله کردن دسفری اکسامین            105

5-8- تعیین وجود دسفری اکسامین B در ماده استخراج شده 105

5ـ ٩ـ بهینه سازی محیط کشت تولید دسفری اکسامین        107

5ـ ٩ـ ١ـ بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین      107

5 ـ ٩ـ ١ـ ١ـ بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین در یک محدوده غلظت          107

5ـ ٩ـ ٢ـ بررسی اثر اسیدآمینه ترئونین و اسید آمینه لوسین و ویتامین تیامینB1) ( برتولید دسفری اکسامین   108

5 ـ ٩ـ ٣ـ بررسی گلوکز و ملاس و سوکروز بر تولید دسفری اکسامین            108

5ـ ٩ـ ٤ـ بررسی اثر شلاته کننده های کاتیون بر تولید دسفری اکسامین            108

5 ـ ٩ـ ٥ـ استفاده از محیط کشت عصاره مخمر به جای استفاده از محیط کشت Soybean            109

5 ـ ٩ـ ٦ـ بررسی اثر مواد معدنی مختلف بر میزان تولید دسفری اکسامین        109

5 ـ٩ـ٦ـ١ـ بررسی تاثیر مواد معدنی در غلظت های مختلف بر میزان تولید دسفری اکسامین           111

5 ـ ١٠ - بررسی پروتئاز تولیدی از استرپتومایسس پیلوسوس در حضور شلاته کننده ها و مواد معدنی مختلف          112

5 ـ ١٠ـ ١ـ کشت باکتری و سنجش پروتئاز        112

5 ـ ١٠ـ 2ـ تخلیص کازئین    113

فصل ششم

6ـ ١ـ بررسی خصوصیات مرفولوژیکی ماکروسکوپی استرپتومایسس پیلوسوس 115

6ـ ١ـ ١¬ـ خصوصیات ماکروسکوپی سویه استاندارد بر روی محیط کشت جامد            115

6 ـ ١ـ٢ـ خصوصیات ماکروسکوپی سویه استاندارد در محیط کشت مایع          115

6 ـ ٢ـ بررسی خصوصیات مرفولوژیکی میکروسکوپی استرپتومایسس پیلوسوس           116

6 ـ٣ـ رسم منحنی رشد استرپتوماسیس پیلوسوس در محیط کشت MYB           116

6-4- رسم منحنی pH بر حسب زمان در محیط کشت Soybean حاوی سویه استرپتومایسس پیلوسس          118

6 ـ ٥ـ تشخیص کیفی و کمی دسفری اکسامین تولیدی        120

6-5-1- تشخیص کیفی و تولید و یا عدم تولید دسفری اکسامین         120

6ـ٥ـ2ـ رسم نمودار استاندارد دسفرال    120

6ـ٥ـ3ـ میزان دسفری اکسامین تولیدی در هر روز توسط سویه استرپتومایسس پیلوسوس در محیط Soy bean           121

6-6- نتایج مربوط به استخراج دسفری اکسامین تولید شده توسط سویه استرپتومایسس پیلوسوس     122

6-6-1- نتایج مربوط به تأیید وجود دسفری اکسامین B در ماده استخراج شده    122

6-7- بهینه سازی محیط کشت تولید دسفری اکسامین        124

6-7-1 بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین       124

6-7-1-1- بررسی اثر اسید آمینه ترئونین بر تولید دسفری اکسامین در یک محدوده غلظت            124

6ـ7ـ ٢ـ بررسی اثر اسید آمینه های ترئونین و لوسین و ویتامین تیامین (B1 )   126

6 ـ 7ـ٣ـ بررسی گلوکز ، ملاس، سوکروز بر تولید دسفری اکسامین   126

6ـ 7ـ ٤ـ بررسی اثر شلاته کننده های کاتیون بر میزان تولید دسفری اکسامین    127

6ـ 7ـ ٥ـ استفاده از محیط کشت عصاره مخمر به جای استفاده از محیط کشت Soybean  128

6 ـ 7ـ ٦ـ بررسی اثر مواد معدنی مختلف بر میزان تولید دسفری اکسامین        128

6 – 7 – 6 – 1 – بررسی اثر مواد مختلف با غلظت متفاوت بر میزان تولید دسفری اکسامین        130

6ـ8ـ بررسی پروتئاز تولیدی از استرپتومایسس پیلوسوس در حضور شلاته‌کننده و مواد معدنی مختلف         139

فصل هفتم

- بحث و نتیجه گیری          143

- پیشنهادات          147

- فهرست منابع      149

چکیده

دسفری اکسامینB،‌ تنها سیدروفوری است که فرم مزتیله آن (نمک متان سولفونات دسفری اکسامین B) با نام تجاری دسفرال جهت درمان بیماران تالاسمی، به منظور شلاته کردن بار اضافی آهن، استفاده می گردد.

به همین منظور جهت تولید دسفری اکسامین B، از سویه استرپتومایسس پیلوسوس استفاده گردید و سویه مربوطه در محیط کشت Soy bean کشت داده شد و دسفری اکسامین آن بوسیله استفاده از محلول فنل- کلروفرم و اتر استخراج گردید. به منظور طراحی این سیستم بیولوژیکی و افزایش بهره برداری از محصول مذکور از منابع کربن و نیتروژن مختلف استفاده گردید و تاثیر هر یک بر میزان دسفری اکسامین تولیدی بررسی شد. چنانچه مشاهده گردید که اسید آمینه ترئونین، افزایش قابل ملاحظه ای بر دسفری اکسامین تولیدی از سویه مذکور دارد و مقدار %125/0 ترئونین، در محیط کشت Soy bean، بسیار مطلوب می باشد. از طرفی اثر ویتامین تیامین (B1)بررسی گردید و مشاهده شد که تاثیر مثبت بر دسفر اکسامین تولیدی دارد و در رده بعد از اسید آمینه ترئونین قرار می گیرد. همچنین اثر اسید آمینه لوسین نیز بر تولید دسفری اکسامین مثبت بوده و در رده بعد از ویتامین تیامین (B1) قرار می گیرد.

در ایـن تحقـیق از شلاته کننـده های کاتیونی EDTA، 8-hydroxyquinoline در محـیط کشت Soy bean استفاده شد و مشاهده گردید که شلاته کننده های مذکور اثر منفی بر تولید دسفری اکسامین دارند در نتیجه، کاتیونها، اثر مثبت بر افزایش میزان دسفری اکسامین تولیدی خواهند داشت به همین منظور مواد معدنی مختلف از جمله اثر

1. 2H2O,MgSO4.7H2O,ZnSO4.7H2O, MnCl2, FeSO4.7H2O

و همچنین اثرCaCl2.2H2O,MgSO4.7H2O به طور همزمان در محیط کشت Soy bean بررسی گردید.

در این تحقیق نتایج مطلوبی بدست آمد، بطوری که کلسیم (بصورت CaCl2.2H2O) اثر قابل ملاحظه‌ای بر افزایش میزان دسفری اکسامین تولیدی از سویه مذکور دارد و مقدار 8/2، و 2، CaCl2.2H2O سبب افزایش قابل توجهی بر میزان محصول مذکور می گردد. و بدین ترتیب تاثیر مثبت کلسیم، بر تولید دسفری اکسامین مشخص گردید.

در این آزمایشات تاثیر مثبت روی، منیزیم و منگنز بر دسفری اکسامین تولیدی آشکار گردید بطوری که غلظت   2-10 × 4/0، ZnSO4.7H2O و   6/0، MgSO4.7H2O و   2، MnCl2 سبب افزایش تولید دسفری اکسامین شد.

از طرفی استفاده همزمان CaCl2.2H2O,MgSO4.7H2O در محیط کشت Soy bean اثر منفی بر تولید دسفری اکسامین را نشان داد.

همچنین بررسی ها در مورد آهن (بصورت FeSO4.7H2O)‌ نشان داد که افزایش غلظت آهن، سبب کاهش میزان دسفری اکسامین تولیدی گردید.

و اینگونه با استفاده از منابع نیتروژن و مواد معدنی مختلف بهینه سازی محیط کشت انجام گرفت و تولید دسفری اکسامین از سویه استرپتومایسس پیلوسوس به میزان قابل ملاحظه ای افزایش یافت.

در این تحقیق، پروتئاز تولیدی از سویه استرپتومایسس پیلوسوس نیز بوسیله روش لوری (Lowry) اندازه گیری شد و اثر روی بصورت ZnSO4.7H2Oو آهن بصورت FeSO4.7H2O نیز بررسی گردید و مشاهده شد که افزایش غلظت روی، سبب افزایش پروتئاز تولیدی، از سویه مذکور گردید.

مقدمه

چه قدر زیبا و شاعرانه است که انسان به نوای دلنواز عاشقانه‌ای که در دل موجودات زنده نواخته می شود گوش دهد. تمام پدیده های هستی که زائیده اراده و مشیت الهی هستند منظر شناخت خداوند قادرند و چه با شکوه است علمی که انسان طالب معرفت را به سرچشمه شناخت این پدیده ها راهنمایی کند.

چشم دل بازکن که جان بینی                                       آنچه نادیدنی است آن بینی

امروزه عرصه ای از حیات بشری را نمی توان یافت که تأثیر مثبت از بیوتکنولوژی نداشته باشد. کلمه بیوتکنولوژی که از دو بخش بیو (به معنی زندگی و موجودات زنده) و تکنولوژی (به معنای هنر بشر در استفاده از علم) تشکیل شده است [10] بطور کلی بیوتکنولوژی به مفهوم استفاده از موجودات زنده، اندام ها و سلولهای آنها برای تولید یک فرآورده با خدمات با ارزش اقتصادی به منظور بهبودرفاه بشر می باشد. [10] بعبارت دیگر بیوتکنولوژی دانشی است که در رابطه با استفاده از موجودات و متابولیتهای آنها جهت تولید فرآورده های مختلف دارویی، غذایی، شیمیایی و غیره در مقیاس صنعتی بحث می کند. [14]

سرآغاز بیوتکنولوژی به ده هزار سال پیش برمی گردد. [10] روند تکاملی بیوتکنولوژی در طی هزاران سال شکل گرفته است، ولی بیوتکنولوژی مدرن در اواسط دهه 70 متولد شد. [14] از همان آغاز، بیوتکنولوژی در قالب مهندسی شیمی توسعه یافت، از این رو با توسعه ی فرآیندهای صنعتی، گستردگی بیشتری پیدا کرد. [14) بیوتکنولوژی از تکنیکهای مختلف ژنتیک، میکروبیولوژی کاربردی، شیمی، بیو شیمی، بیو لوژی، مهندسی فرآیند و غیره تشکیل می‌شود.[14]

این فایل به همراه چکیده، فهرست مطالب، متن اصلی و منابع تحقیق با فرمت docx( wordقابل ویرایش) در اختیار شما قرار

می گیرد.

تعداد صفحات:186

رائه شده استفاده نمائید این لینک امکان 10 بار دانلود در 5 روز آینده را دارد.

پایان نامه بررسی تثبیت بیولوژیک نیتروژن در اثر همیاری سویه های مختلف باکتری آزوسپریلوم با ارقام مختلف گندم با استفاده از تکنیک

اختصاصی از فی فوو پایان نامه بررسی تثبیت بیولوژیک نیتروژن در اثر همیاری سویه های مختلف باکتری آزوسپریلوم با ارقام مختلف گندم با استفاده از تکنیک 15N دانلود با لینک مستقیم و پر سرعت .

تعداد  صفحات :  183 
فرمت فایل: word(قابل ویرایش)  
 فهرست مطالب:
چکیده..............................................................10    
مقدمه ................................................................13                                                                            
فصل اول:کلیات      .....................................................................15                                                                     
1-کشاورزی پایدار                   .         ......................................16    
1-1کودهای بیولوژیک...............................................................18
1-2استفاده از میکرو‌ارگانیزم‌ها به عنوان کود بیولوژیک....................19
1-3-انواع کودهای بیولوژیک......................................................20
2-اهمیت گندم..........................................................................20
2-1-تاریخچه و پیدایش گندم........................................................22
2-2-وضعیت کشت گندم در جهان..................................................22
2-3-وضعیت کشت گندم در ایران...................................................24
2-4-وضعیت کشت گندم در استان تهران..........................................25
2-5-شرایط آب‌وهوایی گندم..........................................................26
2-6-مرفولوژی گندم...................................................................27
2-6-1-ریشه............................................................................27
2-6-2-ساقه............................................................................28
2-6-3-پنجه.............................................................................29
2-6-4-برگ............................................................................30
2-6-5-گل‌آذین.........................................................................31
2-6-6-دانه.............................................................................32
2-7-عوامل محیطی مؤثر بر رشدونمو گندم.....................................33
2-7-1خاک...............................................................................33
2-7-2-رطوبت.........................................................................34
2-7-3-حرارت.........................................................................35
2-7-4-نور............................................................................36
2-7-4-1-طول روز..................................................................36
2-7-4-2-شدت نور..................................................................36
2-8-عملکرد دانه گندم و عوامل مؤثر بر آن....................................36
فصل دوم:بررسی منابع...............................................................42
1-نیتروژن در طبیعت..................................................................43
2-شکلهای نیتروژن در خاک........................................................44
2-1-نیتروژن معدنی خاک............................................................45
2-2-  نیتروژن آلی خاک.............................................................45
3-نقش نیتروژن در گیاه..............................................................45
4-چرخه نیتروژن......................................................................46
4-1راههایی که نیتروژن در دسترس گیاه قرار می‌گیرد
 و یا به خاک اضافه می‌شود. .........................................................47
4-1-1معدنی شدن نیتروژن خاک....................................................47
4-1-2وارد شدن نیتروژن از اتمسفر به خاک.....................................48
4-1-3-کاربرد کودهای شیمیایی ازته...............................................49
4-1-4-تثبیت نیتروژن به روش بیولوژیک..........................................50
4-2-راههایی که نیتروژن از دسترس گیاه و یا از خاک خارج می‌شود........51
4-2-1-غیر متحرک شدن (متوقف شدن یا آلی شدن ) نیتروژن................51
4-2-2-نیترات زدایی.....................................................................52
4-2-3-جذب نیتروژن بوسیله گیاهان.................................................54
4-2-4-آبشویی نیتروژن.................................................................55
4-2-5-تلفات نیتروژن به صورت آمونیاک...........................................55
4-2-6-تلفات نیتروژن از طریق فرسایش...........................................56
5-سیستمهای بیولوژیک تثبیت کننده نیتروژن.....................................56
5-1تثبیت نیتروژن به روش همزیستی.............................................57
5-1-1همزیستی باکتریهای ریزوبیوم و گیاهان خانواده لگومینوز...........57
5-1-2-همزیستی ریزوبیوم با گیاهان غیر لگوم..................................59
5-1-3-همزیستی اکتینوریزی.........................................................59
5-1-4-همزیستی سیانوباکتریها و گیاهان.........................................60
5-1-4-1-همزیستی سیانوباکتری آنابنا و آزولا..................................61
5-1-4-2-همزیستی نوسترک و آنابنا باسیکادها...................................62
5-1-4-3-همزیستی سیانوباکتری نوسترک و گانرا...............................62
5-1-5-همزیستی سیانوباکتریها و دیاتومه‌ها......................................63
5-1-6-همزیستی سیانوباکتریها و بریوفیتها......................................63
5-1-7-همزیستی سیانوباکترها و قارچها (تشکیل گلسنگ)....................65
5-2-تثبیت نیتروژن به روش آزاد....................................................65
5-2-1-باکتریهای هتروتروف باکتریهای بیهوازی...............................66
5-2-1-1-باکتریهای بی هوازی......................................................66
5-2-1-2-باکتریهای بیهوازی اختیاری.............................................67
5-2-1-3-باکتریهای هوازی...........................................................67
5-2-1-4-سیانوباکتریها................................................................68
5-2-2-فتواتوتروف‌های آزادزی......................................................69
5-2-2-1-باکتریهای فتوسنتز کننده..................................................69
5-3-تثبیت نیتروژن به روش همیاری..............................................71
5-3-1-تعریف همیاری................................................................71
5-3-2-دلایل تثبیت نیتروژن به روش همیاری...................................72
5-3-3-همیاریهای فیلوسفری........................................................72
5-3-4-همیاریهای ریزوسفری....................................................................73
6-بیوشیمی تثبیت نیتروژن مولکولی..............................................................73
6-1ساختار آنزیم نیتروژناز و نحوه تامین انرژی
 مورد نیاز برای تثبیت ازت مولکولی................................................................74
6-2کارایی................................................................................77
6-3-تولید هیدروژن و خروج آن.......................................................................81
7-همیاری باکتریهای جنس آزوسپیریلوم  با گیاهان...............................................83
7-1اکولوژی آزوسپیریلوم................................................................................83
7-2گیاهان میزبان..........................................................................................84
7-3-طبقه‌بندی..............................................................................................84
7-4-مشخصات باکتری....................................................................................85
7-5-تثبیت نیتروژن وابسته به هیدروژن..............................................................88
7-6-احیای نیترات (نیترات زدایی).....................................................................88
7-7-عوامل موثر در اشغال ریشه توسط آزوسپیریلوم و تاثیر آن بر رشد گیاه...............89
7-8-تولید ساخت.مان کیست مانند......................................................................90
7-9-تولید سیدروفور......................................................................................91
7-10تولید مواد کشنده باکتریها........................................................................92
7-11جذب سطحی باکتریها به ذرات خاک............................................................92
7-12-تولید فیتوهورمونها و دیگر مواد تحریک کننده رشد گیاه.................................93
7-13-تغییر در فیزیولوژی و موروفولوژی ریشه..................................................93
7-14-نقشهای احتمالی موسیژل.......................................................................94
7-15-مکانیزمهای جذب آزوسپیریلوم بطرف ریشه................................................94
7-16-شیمیوتاکتیک  (کموتاکتیک )......................................................................95
7-17مراحل اشغال ریشه توسط آزوسپیریلوم.......................................................97
7-17-1-اتصال باکتریها به پوست ریشه............................................................97
7-17-2-اشغال بافت ریشه.............................................................................98
7-18-تاثیر آزوسپیریلوم در عملکرد گیاهان مختلف..............................................98
8-نیتروژن -15..........................................................................................105
فصل سوم:موادو روشها................................................................................110
1-مواد مورد آزمایش....................................................................................111
1-1تهیه ماده تلقیح......................................................................................111
1-2-بررسی روابط همزیستی سویه‌های مخالف باکتری آزوسپریلوم با ارقام مختلف گندم با استفاده از ایزوتوپ15N در شرایط گلخانه........................................................112
1-2-1-زمان و محل اجرای آزمایش................................................................112
1-2-2-خصوصیات فیزیکی و شیمیایی خاک مورد استفاده....................................112
1-2-3-دمای گلخانه...................................................................................113
1-2-4-مشخصات ارقام گندم مورد استفاده......................................................114
1-2-4-1-رقم طبسی..................................................................................114
1-2-4-2-رقم مهدوی.................................................................................114
1-2-4-3-رقم موتانت طبسی.........................................................................115
1-2-5-مشخصات طرح آزمایشی.....................................................................116
1-2-6-مشخصات فاکتورهای آزمایش..............................................................116
1-2-7-عملیات کاشت و داشت.......................................................................116
1-2-8-کاربرد ایزوتوپ پایدار نیتروژن-15......................................................117
1-2-9-صفات اندازه‌گیری شده......................................................................120
1-2-10-محاسبات آماری.............................................................................121
1-3-ارزیابی کارآیی سویه‌های باکتری آزوسپریلوم با  ارقام بومی، اصلاح شده و لاین موتانت گندم و تأثیر کاربرد آنها بر عملکرد و برخی از صفات زراعی گندم در شرایط آب‌وهوایی کرج...........................................................................................121
1-3-1-خصوصیات اقلیمی منطقه...................................................................121
1-3-2-مشخصات اقلیمی محل اجرای آزمایش در سال زراعی 83-1382................122
1-3-3-خصوصیات. فیزیکی و شیمیایی خاک محل آزمایش....................................123
1-3-4-مشخصات ارقام مورد استفاده .............................................................123
1-3-5-مشخصات طرح آزمایشی...................................................................123
1-3-6- مشخصات فاکتورهای آزمایش...........................................................123
1-3-6-1-آزوسپریلوم...............................................................................123
1-3-7-عملیات زراعی..............................................................................124
1-3-7-1-عملیات کاشت............................................................................124
1-3-7-2-علمیات داشت............................................................................125
1-3-7-3-عملیات برداشت..........................................................................125
1-3-7-4-صفات اندازه‌گیری شده.................................................................126
فصل چهارم:نتایج و بحث...........................................................................130
گلخانه....................................................................................................131
1-ارتفاع گیاه...........................................................................................132
2-طول سنبله...........................................................................................135
3-تعداد پنجه گیاه.......................................................................................138
4-سطح برگ پرچم....................................................................................141
5-وزن خشک اندام هوایی............................................................................144
6-تعداد سنبله در گیاه.................................................................................147
7-درصد تثبیت بیولوژیک نیتروژن................................................................151
مزرعه..............................................................................................154
8-ارتفاع گیاه......................................................................................155
9-طول سنبله......................................................................................158
10تعداد پنجه در گیاه............................................................................161
11-سطح برگ پرچم.............................................................................163
12-تعداد سنبله درواحد سطح..................................................................167
13-تعداد دانه در سنبله...........................................................................170
14-عملکرد دانه....................................................................................173
15-بیوماس..........................................................................................177
16-شاخص برداشت...............................................................................181
17-وزن هزاردانه..................................................................................184
18-جذب نیتروژن...................................................................................186
پیوست..................................................................................................190
منابع....................................................................................................191
چکیده:

آزوسپریلوم به دلیل توان تثبیت نیتروژن مولکولی در ارتباط همیاری با گیاهان مهم زراعی مانند انواع غلات و همینطور تولید هورمونهای محرک رشد گیاه در سالهای اخیر به عنوان یک کود بیولوژیک مورد توجه قرار گرفته است.به همین دلیل تحقیق در مورد میزان فعالیت سویه های باکتری با ارقام مختلف گندم هدف این بررسی قرار گرفت:
به منظور تثبیت بیولوژیک نیتروژن در اثر همیاری سویه های آزوسپریلوم با ارقام مختلف گندم،دو آزمایش در سه بخش آزمایشگاه، گلخانه و مزرعه طی مدت دو سال پژوهش انجام گردید
الف)جداسازی،تکثیرو تولید مایه تلقیح سویه های آزوسپریلوم در شرایط آزمایشگاه
ب)بررسی کارایی تعدادی از سویه های باکتری آزوسپریلوم با ارقام طبسی،مهدوی و لاین موتانت طبسی گندم با استفاده از تکنیکN15
ج) بررسی کارایی تعدادی از سویه های باکتری آزوسپریلوم و تاثیر کاربرد آنها بر عملکرد و برخی صفات زراعی در سه رقم طبسی،مهدوی و لاین موتانت طبسی گندم.
الف)در این تحقیق 80 نمونه خاک ریزوسفری و غیر ریزوسفری  ار اراضی تحت کشت گیاهان مختلف زراعی تهیه گردید و برای جداسازی آزوسپریلوم ابتدا رقتهای خاک در محیط نیمه جامد اکن کشت داده شدند و بر روی محیط RC کلونیهای ریز قرمز رنگ به عنوان آزوسپریلوم خالص سازی  شده اند و تحت آزمایشهای  ترشح هورمون اکسین و توان حل کنندگی فسفر آلی و معدنی قرار گرفتند.
ب) دو فاکتور،آزوسپریلوم در 5 سطح شامل یک سطح عدم کاربرد باکتری و 4 سطح کاربرد سویه های مختلف Az.21 ,Az.31 ,Az.52 ,Az.54    و گندم در سه سطح بومی،اصلاح شده و لاین موتانت بر اساس آزمایش فاکتوریل در قالب طرح کرتهای کاملا تصادفی در 4 تکرار در شرایط گلخانه بررسی گردید.
به منظور بررسی تثبیت نیتروژن از ایزوتوپ پایدار 15N استفاده شد.
نتایج حاصله نشان داد که بین سویه های مختلف آزوسپریلوم و هم بین ارقام مختلف گندم از نظر تاثیر بر سطح برگ پرچم.وزن خشک اندام هوایی،تعداد سنبله ،طول سنبله و Ndfa اختلاف معنی داری در سطح 1% وجود دارد.در بین ازقام مختلف گندم ارتفاع گیاه در سطح 5%معنی دار و تعداد پنجه معنی دار نشده است و همچنین در بین سویه های آزوسپریلومی ارتفاع گیاه معنی دار نگردیده است.
ارقام گندم به دلیل اختلاف فاحش ژنتیکی و نیز سویه های آزوسپریلومی به دلیل تفاوتهای برقراری همیاری با هم اختلافاتی را دارند.
بهترین رقم و بهترین باکتری در اکثر صفات مورد بررسی  لاین موتانت و Az.21    بوده است.
ج) دو فاکتور،آزوسپریلوم در 5 سطح شامل یک سطح عدم کاربرد باکتری و 4 سطح کاربرد سویه های مختلف Az.21 ,Az.31 ,Az.52 ,Az.54    و گندم در سه سطح بومی،اصلاح شده و لاین موتانت بر اساس آزمایش فاکتوریل در قالب طرح کرتهای کامل تصادفی در 4 تکرار در شرایط گلخانه بررسی گردید.
بین کاربرد ارقام مختلف گندم و سویه های مختلف آزوسپریلوم در تمامی صفات زراعی بجز تعداد پنجه در سطح 1% اختلاف معنی داری مشاهده شد.
بهترین رقم و بهترین باکتری در اکثر صفات مورد بررسی  لاین موتانت و AZ.21    بوده است.
بنابراین با توجه به نتایج بدست آمده از کلیه آزمایشات انجام شده فوق می توان چنین اظهار داشت که کاربرد آزوسپریلوم می تواند بسیار مفید در عملکرد و جذب عناصر غذایی و نیز نقش مهمی در کاهش کودهای شیمیایی داشته باشد.البته باید در گزینش سویه های آزوسپریلوم دقت لازم مبذول شود زیرا بین سوشها اختلاف معنی داری از نظر برقراری همیاری وجود
دارد.